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毛細(xì)管色譜柱的選擇
點(diǎn)擊次數(shù):4117 更新時(shí)間:2017-02-21

       毛細(xì)管色譜柱是目前氣相色譜中用到zui多的色譜柱,可以說是氣相色譜分離的核心,今天就和大家說說這一根毛細(xì)管色譜柱從選用、安裝到保養(yǎng)維護(hù)乃至更換的那些事兒??纯匆桓?xì)管色譜柱的一生都經(jīng)歷了什么,我們?nèi)绾巫瞿苎娱L它的壽命呢?

    分析時(shí),選擇*的毛細(xì)管柱可能是一件非常困難的任務(wù)。雖然沒有色譜柱選擇的簡(jiǎn)易技巧、捷徑、竅門或秘訣,但卻有些指南和概念來簡(jiǎn)化此過程。

    一根色譜柱的規(guī)格描述包括其固定相的種類和內(nèi)外部尺寸(柱內(nèi)徑、長度和膜厚等)。不同規(guī)格的色譜柱,對(duì)樣品的分離結(jié)果影響也不盡相同,如樣品分離的洗脫順序、保留時(shí)間、分離度和峰形/峰高等。另外,在實(shí)際分析應(yīng)用中,色譜柱的性能指標(biāo),如惰性、塔板數(shù)和柱流失率等,同樣會(huì)嚴(yán)重影響到樣品的分離效果。

毛細(xì)管柱的種類

    一般將毛細(xì)管柱分為四種類型:壁涂開管柱(WCOT)、載體涂漬開管柱(SCOT)、交聯(lián)毛細(xì)管柱(CLOT)和多孔層開管柱(PLOT)。經(jīng)典的毛細(xì)管柱為壁涂開管柱(WCOT——WallCoated Open Tubular Column),管內(nèi)經(jīng)預(yù)處理后將固定液直接涂漬在內(nèi)壁上。因其制備難、柱子的重復(fù)性差、內(nèi)表面小、涂漬量小和相比β值大,將導(dǎo)致有效塔板數(shù)和實(shí)際分離能力不高,且熱穩(wěn)定性也較差,已很少使用。

   多孔層壁涂柱(PLOT——PorousLayer Open Tubular Column):內(nèi)壁上僅涂一層多孔性吸附劑微粒,是毛細(xì)管氣固色譜柱。

    載體壁涂柱(SCOT——SupportCoated Open Tubular Column):內(nèi)壁上先涂一層載體,載體上再涂固定液。固定液膜可以較厚,柱容量也較大。必須注意,以上兩種柱子中的載體只是涂布于毛細(xì)管柱的壁上,而非充滿整根柱子。

    交聯(lián)毛細(xì)管柱(CLOT——Cross-LinkedOpen Tubular Column):涂好固定液后再用偶聯(lián)劑交聯(lián)鍵合,柱子性能有很大改善,能耐高溫,抗水、抗溶劑。

     其中PLOT柱主要用于*氣體和低分子量有機(jī)化合物的分離;SCOT柱所用固定液的量大一些,故柱容量大一些,但由于制備技術(shù)復(fù)雜,應(yīng)用也不太普遍。毛細(xì)管GC中的主力軍是CLOT,其柱材料大多用熔融石英,即所謂彈性石英柱。

毛細(xì)管氣相色譜柱的選擇

a. 固定相的選擇原則和方法

    理論上講,選擇固定相遵循相似性原則,即:用非極性固定相分析非極性物質(zhì),用極性固定相分析極性物質(zhì),用含芳香基團(tuán)的固定相分析芳香族化合物。在填充柱時(shí)代,這個(gè)想法是非常正確的,因?yàn)槟莻€(gè)時(shí)候,分離度是首先需要把握的關(guān)鍵因素,分不開,就沒辦法想其它。它的理由在于塔板理論的推論,即:組分在固定相中有越大的溶解度差異,就會(huì)產(chǎn)生越大的分離度。

    但是在毛細(xì)管色譜時(shí)代,分離度不再始終是分析的問題。毛細(xì)管具有幾十萬塊塔板,如此大的柱效率,以至于不再需要充分考慮分離問題了。這個(gè)時(shí)候,樣品兼容性、使用溫度、穩(wěn)定性、柱流失情況等,都可能成為選擇的主要理由。

    例如分析甲醇乙醇丙醇等低級(jí)醇類,正常應(yīng)選擇wax類高極性色譜柱。但是在雜質(zhì)較少的情況下,選擇DB-1這樣的非極性柱具有更高的靈活性和使用壽命。具體選擇

要依據(jù)以下規(guī)則:

1.因?yàn)榉菢O性毛細(xì)管柱具有明顯的穩(wěn)定性、高使用溫度、良好的色譜峰形等有利因素,因此易分離物質(zhì)應(yīng)首先選用極性小的色譜柱。

2.分析氫鍵型物質(zhì)用氫鍵型PEG柱更佳。

3.輕烴或*氣體用PLOT柱更佳。

4.高苯基固定相對(duì)芳香族物質(zhì)保留能力更強(qiáng)。但是分析二甲苯等芳烴異構(gòu)體,Wax類強(qiáng)極性色譜柱。

   在過去的幾十年中,所有的GC應(yīng)用中,非極性色譜柱的使用率高于中等極性柱和極性柱。一般來說,非極性柱,如HP-5MS柱,可應(yīng)用與于50%以上的分析。而極性或中等極性柱,如PEG柱,大概適用于25%的分析應(yīng)用中。通常,我們會(huì)先選擇非極性色譜柱,而極性色譜柱會(huì)選擇性的用于比較簡(jiǎn)單的樣品(較少種類化合物組成的樣品)。

   在選擇適用的固定相時(shí),分析設(shè)備和分析條件也是需要參考的指標(biāo)。如檢測(cè)器的種類、載氣和進(jìn)樣體積等。

    如果我們不考慮對(duì)樣品選擇性和檢測(cè)靈敏度的影響,那么就使用檢測(cè)器低響應(yīng)固定相的色譜柱。比如說含氰基的固定相,像1301、1701、624等這樣的色譜柱就盡量不要與NPD(氮磷檢測(cè)器)連用。對(duì)于超低流失的固定相,如-1MS或-5MS的柱子,因?yàn)樗鼈兛梢员WCzui低的檢測(cè)基線和噪聲水平,所以在做低或超低檢測(cè)限樣品時(shí),超低流失色譜柱是的選擇。如果我們使用的載氣不純,或是設(shè)備中有氣體泄漏,這樣的問題無法解決或無法及時(shí)解決,為了不使柱固定相過早的被破壞,高溫適用固定相的色譜柱是相對(duì)好的選擇。

    另外,除非方法需要,我們盡量選擇鍵合固定相的色譜柱,對(duì)比非鍵合相和非交聯(lián)相色譜柱,交聯(lián)鍵合固定相色譜柱對(duì)樣品種類和進(jìn)樣體積的耐受力更強(qiáng),柱性能下降的zui慢。

   在做應(yīng)用方法確證時(shí),我們可同時(shí)使用非極性柱和極性柱,對(duì)色譜峰鑒定或分離結(jié)果進(jìn)行確證。通常我們做農(nóng)藥分析方法確證時(shí),選用-5MS和 -1701/-35色譜柱;做殘留溶劑分析方法確證時(shí),選用-5MS和-624/-VMS色譜柱;做醇類或FAME分析方法確證時(shí),選用PEG和含氰基固定相色譜柱;做汽油中氧化物分析方法確證時(shí),選用-1和PEG色譜柱。

b. 色譜柱內(nèi)徑的選擇

   標(biāo)準(zhǔn)色譜柱內(nèi)徑(ID)尺寸為0.2mm、0.25mm、0.32mm和0.53mm。少數(shù)方法會(huì)使用到0.1mm和0.8mm內(nèi)徑的柱子。0.25mm是zui常用的色譜柱內(nèi)徑尺寸,而0.53mm的色譜柱通常是替代填充柱用于大體積進(jìn)樣的方法應(yīng)用。

    色譜柱內(nèi)徑的大小對(duì)分離效果的影響是明顯的。越細(xì)的色譜柱,其塔板數(shù)就越高,柱效就越高,但同時(shí)樣品承載容量越小,進(jìn)樣體積就需要減少。但內(nèi)徑越小,通常意味著柱容量的減小,在分析低含量組分時(shí),對(duì)檢測(cè)器靈敏度和進(jìn)樣口分流能力的要求越高。因此在選擇內(nèi)徑的時(shí)候,首先考慮的是樣品分析難點(diǎn),是在于分離還是檢測(cè)。對(duì)于分離困難的樣品,較小口徑的色譜柱;對(duì)于含量過低檢測(cè)困難的樣品,較大口徑的色譜柱。在容易分離的情況下,一般選擇小口徑毛細(xì)管柱可以縮短柱長,減小分析時(shí)間。

c. 色譜柱長度

色譜柱的長短直接影響到保留時(shí)間和分離效率。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用的色譜柱長多為5m、7.5m、10m、12.5m、15m、25m、30m、50m、60m、75m、100m和105m等。zui常見的色譜柱長度是30m。

對(duì)于快速分析來說,除了選擇適當(dāng)?shù)膬?nèi)徑,柱長度也短許多(例如5~15mx 0.25mm)。只有這樣,才有可能在zui短的時(shí)間內(nèi),得到*的分離效果和分析結(jié)果。

如果方法需要改進(jìn)提高分辨率,較長的色譜柱,如60m或100m,是理想的選擇。分辨率與柱長的平方根成正比。需要注意的是,像一根60m長的色譜柱相對(duì)于30m的柱子,其分辨率提高近40%,但分析時(shí)間會(huì)成倍增長。

在揮發(fā)物的分析應(yīng)用中,為了改善分離效果,常使用較長的柱型,如50m、60m和100m等。在氣態(tài)樣品和精細(xì)烴分析應(yīng)用中,較長色譜柱的使用較為普遍。

更長的色譜柱會(huì)影響柱惰性、柱流失和柱效等多個(gè)方面。同時(shí),需要更高的載氣壓力或更換載氣的種類(如把氮?dú)飧鼡Q成氫氣/氦氣)。

d.  色譜柱膜厚

商品化色譜柱的膜厚規(guī)格一般是0.1μm、 0.15μm、 0.25μm、 0.5μm、 1.0μm、 1.5μm、 3μm、5μm等等。實(shí)驗(yàn)室中zui常見的色譜柱膜厚為0.25μm、0.5μm和1μm。

膜厚主要影響兩個(gè)指標(biāo):保留時(shí)間和樣品負(fù)載能力。

另外,色譜柱適用溫度范圍、分析時(shí)間和分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性等也與膜厚有關(guān)。例如一根內(nèi)徑為0.25mm,膜厚為0.1μm的色譜柱可以達(dá)成快速分離的效果,甚至可以改進(jìn)分辨率,降低色譜柱的流失,適用于更寬泛的溫度范圍等。膜厚會(huì)影響到色譜柱惰性,而這個(gè)指標(biāo)在有些應(yīng)用中是非常重要的。同時(shí)膜厚對(duì)色譜柱樣品承載能力的影響也是很明顯的。

0.25μm× 0.25mm、0.5μm × 0.32mm、1μm或1.5μm × 0.53mm規(guī)格的色譜柱在分離效果、保留性能、分辨率、惰性和柱流失等指標(biāo)方面較為均衡,使用也較多。

膜厚與柱內(nèi)徑的關(guān)系體現(xiàn)在相比(β)上。相比β是色譜柱中氣相容積和固定相容積之比,計(jì)算公式為β=r/2d,其中r為色譜柱半徑,d為液膜厚度。相比是決定一個(gè)固定長度色譜柱中組分流出時(shí)間的決定性因素。如果有兩根相同相比和固定相的色譜柱,內(nèi)徑不同,在相同的溫度條件下,兩根色譜柱的分離效果和保留性能相同或相似。

需要注意的是:相比只是決定保留時(shí)間的主要因素,但并不是決定理論塔板數(shù)(柱效率)的主要因素。決定柱容量(zui小檢出量)的主要因素是內(nèi)徑和膜厚,決定柱效率的是內(nèi)徑,決定保留時(shí)間的是相比。在綜合平衡柱容量、柱效率、分析時(shí)間三方面因素的時(shí)候,需要注意相比的影響。

zui后要強(qiáng)調(diào)的一點(diǎn)是,選擇色譜柱是必須要看具體的分析任務(wù)。如果是做法規(guī)分析,則必須按有關(guān)法規(guī)的要求選擇色譜柱。如一些產(chǎn)品的質(zhì)量檢驗(yàn),盡管用毛細(xì)管柱可以得到更好的分析結(jié)果,且分離效率高、分析速度快,但若國家標(biāo)準(zhǔn)或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定用填充柱,那就應(yīng)該用填充柱,否則分析結(jié)果不被法規(guī)所認(rèn)可。當(dāng)然,作為方法開發(fā)的研究,用毛細(xì)管柱常常是有利的。

新色譜柱的驗(yàn)收

    新買的氣相色譜柱到貨后要進(jìn)行驗(yàn)收,驗(yàn)收首先是對(duì)貨物的外包裝進(jìn)行觀察,如有破損,應(yīng)直接拒絕接受,要求供應(yīng)商重新發(fā)貨。打開包裝后,色譜柱如沒有可見的斷裂、破損,可在安裝、老化后使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行柱效測(cè)試。

    新柱子都有說明書,說明書一般都附有質(zhì)量檢測(cè)報(bào)告,附譜圖、條件、試樣等,如果實(shí)驗(yàn)室備有相應(yīng)的測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),可照其條件試驗(yàn)一下,計(jì)算塔板數(shù)、分離度等,與其報(bào)告相差不大即可。亦可依據(jù)自己的分析用途,用本實(shí)驗(yàn)室的實(shí)際條件進(jìn)行樣品分析,與實(shí)驗(yàn)室以前的正常柱子比較,保留時(shí)間、分離度、塔板數(shù)等是否正常即可判斷。建議保留新柱子的測(cè)試圖譜,以備以后柱效下降時(shí)對(duì)比參考。

色譜柱的安裝

    把毛細(xì)管柱安裝在色譜儀上時(shí),需要將其兩端分別與進(jìn)樣口和檢測(cè)器相連接。一般儀器所用的接頭有兩種,分別是內(nèi)螺紋接頭和外螺紋接頭。原理都是用一個(gè)石墨密封墊,通過接頭壓緊而達(dá)到固定和密封的目的。

正確的安裝請(qǐng)參考以下步驟:

a. 檢查氣體過濾器、載氣、進(jìn)樣墊和襯管等,保證輔助氣和檢測(cè)器的用氣暢通有效。如果以前做過較臟樣品或活性較高的化合物,需要將進(jìn)樣口的襯管清洗或更換。

b. 先將密封墊套在柱頭,此時(shí)應(yīng)將柱頭向下,避免密封墊碎屑進(jìn)入柱管而造成堵塞。將石墨墊套在柱頭后,應(yīng)將柱頭截去1~2cm。可用專門的柱切割器,也可用一個(gè)開安剖瓶的磁片,在柱頭上輕輕地劃一下,然后用手掰斷。這樣做可以保證柱端是整潔的,又避免了柱頭污染物對(duì)分析的干擾,因?yàn)榻厝チ舜┻^密封墊時(shí)可能進(jìn)入柱頭的污染物,或者運(yùn)輸過程中可能損壞的柱端。

將色譜柱連接于進(jìn)樣口上,色譜柱在進(jìn)樣口中插入深度根據(jù)所使用的GC儀器不同而定。正確合適的插入能zui大地保證試驗(yàn)結(jié)果的重現(xiàn)性。通常來說,色譜柱的入口應(yīng)保持在進(jìn)樣口的中下部,當(dāng)進(jìn)樣針穿過隔墊*插入進(jìn)樣口后,如果針尖與色譜柱入口相差1~2cm,這就是較為理想的狀態(tài)。檢測(cè)器一端則是柱出口盡量接近檢測(cè)點(diǎn)(如FID的火焰),以避免死體積造成的柱外效應(yīng)(具體的插入程度和方法參見所使用GC的使用手冊(cè))。避免用力彎曲擠壓毛細(xì)管柱,并小心,不要讓標(biāo)記牌等有鋒利邊緣的物品與毛細(xì)柱接觸摩擦,以防柱身斷裂受損。

c.用手把連接螺母擰上,擰緊后(用手?jǐn)Q不動(dòng)了)用扳手再多擰1/4-1/2圈,保證安裝的密封程度。因?yàn)椴痪o密的安裝,不僅會(huì)引起載氣的泄漏,而且有可能對(duì)色譜柱造成*損壞。為保證柱端伸出的長度準(zhǔn)確,可在截去柱端后,先量好柱頭伸出長度,然后用記號(hào)筆或改字液在接頭下方的色譜柱上做記號(hào),擰緊接頭以后保證該記號(hào)正好位于柱頭端面。這樣就避免了擰緊過程中柱管移動(dòng)可能造成的伸出長度不準(zhǔn)確。

d. 接通載氣

當(dāng)色譜柱與進(jìn)樣口接好后,可參考表3.4,由柱長、柱內(nèi)徑等參數(shù)選取初始的柱前壓,然后通載氣,調(diào)節(jié)柱前壓以得到合適的載氣流速。

將色譜柱的出口端插入裝有正己烷的樣品瓶中,正常情況下,我們可以看見瓶中穩(wěn)定持續(xù)的氣泡。如果沒有氣泡,就要重新檢查一下載氣裝置和流量控制器等是否正確設(shè)置,并檢查一下整個(gè)氣路有無泄漏。等所有問題解決后,將色譜柱出口從瓶中取出,保證柱端口無溶劑殘留,再進(jìn)行下一步的安裝。

e. 將色譜柱連接于檢測(cè)器上,其安裝和注意的事項(xiàng)與色譜柱與進(jìn)樣口連接大致相同。如果在應(yīng)用中系統(tǒng)所使用的是ECD或NPD等,那么在老化色譜柱時(shí),應(yīng)該將柱子與檢測(cè)器斷開,這樣檢測(cè)器可能會(huì)更快達(dá)到穩(wěn)定。

f. 確定載氣流量,再對(duì)色譜柱的安裝進(jìn)行檢查。注意:如果不通入載氣就對(duì)色譜柱進(jìn)行加熱,會(huì)快速且*性的損壞色譜柱。

色譜柱的老化與老化效果檢測(cè)

色譜柱安裝和系統(tǒng)檢漏工作完成后,就可以對(duì)色譜柱進(jìn)行老化了。

a.  老化的方法:

老化的方法通常是將色譜柱升至一恒定溫度,通常為其溫度上限。特殊情況下,可加熱至zui高使用溫度之上約10~20℃左右,但是一定不能超過色譜柱的溫度上限,那樣極易損壞色譜柱。

當(dāng)?shù)竭_(dá)老化溫度后,記錄并觀察基線。初始階段基線應(yīng)持續(xù)上升,在到達(dá)老化溫度后5~10分鐘開始下降,并且會(huì)持續(xù)30~90分鐘。當(dāng)?shù)竭_(dá)一個(gè)固定的值后就會(huì)穩(wěn)定下來。如果在2~3小時(shí)后基線仍無法穩(wěn)定或在15~20分鐘后仍無明顯的下降趨勢(shì),那么有可能系統(tǒng)有泄漏或者污染。遇到這樣的情況,應(yīng)立即將柱溫降到40℃以下,盡快的檢查系統(tǒng)并解決相關(guān)的問題。如果還是繼續(xù)的老化,不僅對(duì)色譜柱有損壞而且始終得不到正常穩(wěn)定的基線。

另外,老化的時(shí)間也不宜過長,不然會(huì)降低色譜柱的使用壽命。一般來說,涂有極性固定相和較厚涂層的色譜柱老化時(shí)間長,而弱極性固定相和較薄涂層的色譜柱所需時(shí)間較短。

b. 設(shè)置確認(rèn)載氣流速

對(duì)于毛細(xì)管色譜柱,載氣的種類高純度氮?dú)饣驓錃?。載氣的純度大于99.995%,而其中的含氧量越少越好。如果您使用的是毛細(xì)管色譜柱,那么依照載氣的平均線速度(cm/sec),而不是利用載氣流量(mL/min)來對(duì)載氣做出評(píng)價(jià)。因?yàn)橹У挠?jì)算采用的是載氣的平均線速度。推薦平均線速度值:氮?dú)猓?0~12cm/sec;氫氣:20~25cm/sec。

在載氣的管線中加入氣體過濾裝置不僅可以延長色譜柱壽命,而且很大程度的降低了背景噪音。建議安裝一個(gè)高容量脫氧管和一個(gè)載氣凈化器。使用ECD系統(tǒng)時(shí),能在其輔助氣路中也安裝一個(gè)脫氧管。

c.柱流失檢測(cè)

在色譜柱老化過程結(jié)束后,利用程序升溫作一次空白試驗(yàn)(不進(jìn)樣)。一般是以10℃/min從50℃升至zui高使用溫度,達(dá)到zui高使用溫度后保持10min。這樣我們就會(huì)得到一張流失圖。這些數(shù)值可能對(duì)今后作對(duì)比試驗(yàn)和實(shí)驗(yàn)問題的解決有幫助。

在空白試驗(yàn)的色譜圖中,不應(yīng)該有色譜峰出現(xiàn)。如果出現(xiàn)了色譜峰,通常可能是從進(jìn)樣口帶來的污染物。如果在正常的使用狀態(tài)下,色譜柱的性能開始下降,基線的信號(hào)值會(huì)增高。另外,如果在很低的溫度下,基線信號(hào)值明顯的大于初始值,那么有可能是色譜柱和GC系統(tǒng)有污染。

色譜柱的保存

色譜柱用進(jìn)樣墊將色譜柱的兩端封住,并放回原包裝。在安裝時(shí)要將色譜柱的兩端截去一部分,以確保沒有進(jìn)樣墊的碎屑?xì)埩粲谥小?/span>

色譜柱的重新安裝

色譜柱重新安裝時(shí),密封要注意:

a.安裝位置(尺寸)要重現(xiàn),否則引起峰靈敏度變化;

b.安裝時(shí)防止碎渣進(jìn)入色譜柱引起峰形拖尾;

c.不需要擰得太緊;

e.使用清潔的密封墊,避免用手接觸密封墊,以防手上的油脂污染;

f.密封墊安裝前,要仔細(xì)檢查有無損傷,以防安裝后,有問題時(shí)不易拆除;

g.對(duì)那些不宜重復(fù)使用,如石墨密封墊,重新安裝柱時(shí)要注意及時(shí)更換。

什么時(shí)候該更換色譜柱

     分離度是考察一根色譜柱分離具體樣品的好壞程度的指標(biāo)。色譜的核心任務(wù)就是為了使每個(gè)峰完成分離,得到有合理峰寬的色譜峰,以便獲得較低的檢測(cè)限。然而,塔板數(shù)對(duì)分離度的影響僅僅是平方根的關(guān)系,當(dāng)一根色譜柱的塔板數(shù)下降50%,分離度僅下降7%。

     其實(shí),大多數(shù)用戶僅僅使用色譜柱塔板數(shù)的一小部分。例如,對(duì)一支新的150mm×4.6mm,5mm粒徑的色譜柱來講,廠家測(cè)試報(bào)告上的塔板數(shù)為14,000。使用下面的公式可以估算一支色譜柱的塔板數(shù):N=3000L/Dp                         

L是色譜柱的柱長,以厘米為單位;Dp是填料的粒徑,以微米為單位。

    一支150mm×4.6mm,5mm粒徑的色譜柱的柱效大約為9000,比廠家測(cè)試數(shù)據(jù)低30%。在實(shí)際的工作中,大多數(shù)色譜方法僅僅需要這些塔板數(shù)的一半,可見,色譜柱的塔板數(shù)不是分離中zui重要的參數(shù)。

較好的方法是使用壓力、分離度和峰形的混合指標(biāo)來考察一根色譜柱的狀態(tài)。

    壓力的測(cè)量是zui容易的,通常我們確定的色譜方法要滿足以下的要求:用新柱子時(shí)柱壓不高于2500psi,在任何情況下壓力都不超過3000psi。有統(tǒng)計(jì)表明,超過60%的色譜柱損壞是由于壓力過高的原因。

    分離度是考察色譜柱的一個(gè)非常重要的指標(biāo),只要兩個(gè)組分可以獲得基線分離,對(duì)該分析物的定量就不會(huì)有什么問題。對(duì)于高斯峰來講,1.5的分離度即可得到基線分離;若分離度在1.7至2.0之間則更好。若峰拖尾嚴(yán)重則需要更高的分離度。使用分離度作為色譜柱的評(píng)價(jià)指標(biāo)的好處在于我們可以直觀地看到相鄰的峰的分離情況。

    另外一個(gè)考察色譜柱質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)是峰形拖尾情況,廠家測(cè)試報(bào)告的峰形都非常漂亮,但這并不代表該色譜柱分析實(shí)際樣品的情況。

   通常,在開發(fā)分析方法的過程中,一般會(huì)試驗(yàn)幾根色譜柱,分析足夠多的實(shí)際樣品,就知道當(dāng)分離變差時(shí)是什么樣的情況。在開始時(shí)可使用一個(gè)寬的范圍;如果在開始時(shí)緊縮系統(tǒng)適用性要求,在方法認(rèn)證后再放寬這個(gè)要求,是很困難的。在分析實(shí)際樣品之前進(jìn)行系統(tǒng)適用性考察,以確保該色譜方法滿足分析者可以接受的標(biāo)準(zhǔn)。

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